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發(fā)布時間:3/22/2020 4:11:00 PM

關于色譜圖,色譜圖常見問題主要有三類: 1.色譜峰峰形異常問題,例如,負峰,寬峰,肩峰,雙峰,峰形不對稱等。2.色譜圖中多峰、少峰問題,色譜圖未出峰,出峰比預想的多等。3.色譜峰保留時間問題,保留時間不穩(wěn)定等。

色譜峰形問題的來源:1.色譜柱毀壞:溶解樣品的溶劑不當;第二種相互作用;色譜柱過載;質量過載;體積過載;其它柱外效應;管路連接;采樣速率;時間常數(shù)。2.色譜峰形異常問題分析:色譜峰峰形異常包括峰比預想的要小;樣品粘度過大;進樣器有問題或進樣體積有誤;檢測器設置不正確,定量環(huán)(Loop)體積不正確;檢測器輸出未置零;用了不正確的檢測器輸出信號;檢測池被污染;檢測器的燈可能有問題。

色譜圖多峰少峰問題分析: 色譜圖中未出峰,進樣問題或未進樣或樣品分解,流動相問題:泵未輸液或流動相不正確;檢測器設置不正確,或檢測器有問題。色譜圖中出峰比預想的少,樣品分解;色譜柱柱效喪失;用錯流動相;梯度洗脫時平衡不足。色譜圖多峰少峰問題分析(2):色譜圖中出峰比預想的多(鬼峰);樣品分解或制樣時導入了雜質;流動相被污染,或用錯流動相;流動相中含有穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑發(fā)生變化;前次進樣的后流出物(某些Rt值特大的組分);進樣器被污染,洗針系統(tǒng)出問題或注射器臟;未充分平衡進樣器Loop管;保護柱臟,色譜柱被污染,分辨率下降。

色譜峰保留時間問題分析:1.保留時間飄忽不定(各次運行之間) 系統(tǒng)不穩(wěn)定或未達化學平衡,泵壓力不穩(wěn)(泵頭里有氣泡),進樣體積過大或樣品濃度過大,溫度波動,流動相混合不均勻,色譜柱被污染,保留時間增加或減少(各次運行之間) 系統(tǒng)不穩(wěn)定或化學平衡不足;泵流速變化;溫度變化;色譜柱污染,柱效下降;流動相被污染:溶劑入口過濾器堵或管路堵塞;系統(tǒng)滲漏。2. 保留時間改變到一個新的恒定值;流動相不正確或其組成不正確;泵流速變化;實際輸液的流速不正確(泵失靈或故障);環(huán)境溫度變化;柱溫不正確;色譜柱尺寸或類型不正確;色譜柱被污染;流動相含有穩(wěn)定劑或穩(wěn)定劑發(fā)生變化;輸液系統(tǒng)的梯度滯后體積不正確。

保留時間重現(xiàn)性:pH的影響。化學因素,中性物質:無影響;酸性物質:pH增加,保留降低;堿性物質:pH增加,保留增加。

---本文摘自實驗與分析

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